International Journal of Academic Medicine and Pharmacy
Yazarlar: , Tuğba Kaya , Gülnaz Çulha , Necati Özpınar
Konular:-
DOI:10.29228/jamp.48513
Anahtar Kelimeler:Leishmania spp,Biyobank,Hatay,PCR-RFLP
Özet: Leishmaniasis, Leishmania türü protozoon parazitlerinin neden olduğu önemli tropikal hastalıklardan biridir. Türkiye'nin Akdeniz kıyısında bulunan Hatay’da, Kutanöz Leishmaniasis (KL) önemli bir halk sağlığı sorunu olarak görülmeye devam etmektedir. Çalışmada, Kl şüpheli hastaların, lezyonlarından alınan örneklerin Giemsa boyama yöntemi, in-vitro kültür, kültürde pozitif olarak değerlendirilen örneklerin tiplendirilmesi, kriyoprezervasyonu ve Biyobank (Kriyobank) oluşturulması amaçlanmıştır. Hatay İli Aile Toplum Sağlığı Merkezlerine (Altınözü, Antakya Merkez (Kırıkhan, Samandağ gibi)) başvuran 40 KL şüpheli hastanın lezyonundan yayma preparat hazırlanarak Giemsa boyama yöntemi ile boyandı ve amastigotların varlığı açısından değerlendirildi. Hastaların lezyonlarından aspirasyon materyali alınarak klasik NNN besiyerine ekimi yapıldı ve üreme gözlenen örnekler ITS-1 PCR-RFLP yöntemi ile tiplendirildi. DMSO kullanılarak örneklerin kriyoprezervasyonu yapıldı ve sıvı azot tankına kaldırıldı. KL şüpheli toplam 40 hastaya ait yayma preparatların tamamında amastigotlar görüldü. Klasik NNN besiyerinde 40 örneğin 35’inde promastigotların ürediği ve üreme sonrası RPMI-1640 sıvı besiyerine aktarılan örneklerin tamamının log fazına ulaştığı gözlendi. Bu örneklerin HaeIII enzimi kullanılarak yapılan PCR-RFLP yöntemiyle 25’i L. infantum/donovani, 10 u L. tropica olarak tiplendirildi ve azot tankına kaldırılarak Biyobank (Kriyobank) oluşturulmaya başlandı. Biyobank, bölgemizden izole edilen ve tiplendirilen Leishmania izolatlarından oluşturduğumuz ilk arşivdir. Leishmania izolatları, virulans ve antijenik yapıları kaybolmadan sıvı azot içinde uzun süre saklanabilmektedir. Biyobank’ın; moleküler çalışmalar, hayvan modelleri, ilaç denemeleri gibi pek çok alanda kullanılmasına olanak sağlayacağı kanaatine varılmıştır.